我們可利用高效液相色譜法,測定分離純化積雪草中積雪草酸的含量。
超聲提取積雪草中積雪草酸,將粗提物用石油醚-丙酮體系在硅膠柱上梯度洗脫,HPLC法測定積雪草酸的含量。
色譜條件:采用Waters Symmetry C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流動相為乙腈- 10 mmol·L-1乙酸銨溶液( 38:62,V/V),檢測波長為210 nm,流速為1.0 mL·min-1,柱溫25℃,進樣體積為20μL.結(jié)果積雪草酸在濃度10~200 mg·L-1線性關(guān)系良好(R2=0.9995),其日內(nèi)、日間RSD均小于5.4%,回收率為100.5%。
積雪草中積雪草酸含量為0.99 g· kg-1.經(jīng)提取、分離、純化得到積雪草酸白色粉末,純度為79.0%.結(jié)論本實驗所用分析方法簡便、準確、重復性好,可用于積雪草酸的含量測定,所用提取分離及純化積雪草酸的方法可使中藥中積雪草酸得到有效富集。